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行業(yè)動態(tài)

Biuret法的蛋白質含量測定方法描述

Biuret法是一種常用的蛋白質含量測定方法，通過其與蛋白質結合產生的顏色反應來測定蛋白質的含量。

樣品制備：首先，需要將待測的蛋白質樣品制備成適當?shù)娜芤?。通常情況下，將蛋白質溶解在適當?shù)木彌_液中，以確保反應的穩(wěn)定性和準確性。

加入試劑：將樣品溶液加入到含有Biuret試劑的試管或反應皿中。Biuret試劑通常由堿性銅溶液和鈉鉀氫氧化物組成。

反應產生：當?shù)鞍踪|與Biuret試劑反應時，會產生紫色的絡合物。這是因為蛋白質中的蛋白質質量大約為200個氨基酸殘基，而Biuret試劑中的銅離子與蛋白質中的兩個或更多的肽鍵結合形成絡合物，從而產生紫色的化合物。

測定吸光度：將反應產物的吸光度測定在特定波長下，通常在540nm左右。吸光度與蛋白質的濃度成正比，因此可以通過吸光度的測定來間接測定蛋白質的含量。

對照標準曲線：為了確定樣品中蛋白質的含量，通常需要制備一系列已知濃度的蛋白質標準溶液，測定它們的吸光度，并繪制標準曲線。然后，將待測樣品的吸光度與標準曲線進行比較，從而確定樣品中蛋白質的含量。

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